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鱼elisa检测试剂盒的试验原理和操作步骤

时间:2020-10-22 浏览次数:58

   鱼elisa检测试剂盒的试验原理:
  本试剂盒采用间接竞争一步法。在酶标板中同时加入校准品(或样本)、酶结合物及抗体,酶标板上包被的抗原与加入的校准品(或样本)中的抗原竞争结合加入的抗体,同时酶结合物与抗体结合。用TMB底物显色,样本吸光值与其残留物呋喃唑酮浓度呈负相关,与校准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中呋喃唑酮的含量。
 
  鱼elisa检测试剂盒的操作步骤:
  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;样本孔加待测样本50μL。
  样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次。
  结果判断绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
 
  鱼elisa检测试剂盒的注意事项:
  1、测试程序开始前,将所有试剂至室温。
  2、所有试剂使用前,应轻轻翻转或旋转混合,不要诱发泡沫。
  3、一旦试验开始,应在建议的时间限制内不中断地完成所有的后续步骤。
  4、所有试剂用完后,放好瓶塞。不要交换瓶塞。
  5、每个样品使用单独的一次性的吸头,防止交叉感染。
  6、所有的样品和标准应在同时间运行,以使所有的测试条件是相同的。
  7、不混用不同批次,不用过期试剂。
  8、在实验过程中,检查实验设备的精度和准确度。

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