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植物elisa检测试剂盒实验前的准备工作和操作注意事项

时间:2020-09-21 浏览次数:112

   植物elisa检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验。往预先包被植物水杨酸(SA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的植物水杨酸(SA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
 
  植物elisa检测试剂盒实验前的准备工作:
  1、仔细阅读说明书。
  2、检查试剂盒标签上的有效期,如果超过有效期,请勿使用。
  3、按说明书确定所有试剂齐全。
  4、标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备,尽量分装做备份。
  5、准备好所有实验额外所需物品。
  6、按说明书将所用试剂平衡至室温,根据检测标本数量确定所需试剂的量。
  7、检查试剂盒内每种试剂的贮存条件,保证所有试剂均按照试剂盒内说明书推荐的条件存储。
  8、检查不稳定或者变质的试剂溶液。
  9、保证充分的孵育时间和温度。
  10、切勿使用不同生产批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。
  11、在混合或溶解蛋白溶液时,避免泡沫产生。
 
  植物elisa检测试剂盒的操作注意事项:
  1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
  2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
  3.预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
  4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
  5.所有液体组分使用前充分摇匀。

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