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小鼠ELISA检测试剂盒的实验分析原理和注意事项

时间:2020-08-14 浏览次数:55

   小鼠ELISA检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被待测标本捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的待测标本呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
 
  小鼠ELISA检测试剂盒的定量分析实验原理:
  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中脂蛋白脂酶(LPL)水平。用纯化的脂蛋白脂酶(LPL)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入脂蛋白脂酶(LPL),再与HRP标记的脂蛋白脂酶(LPL)抗原结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的脂蛋白脂酶(LPL)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中脂蛋白脂酶(LPL)浓度。
 
  注意事项:
  1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
 
  2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
 
  3.建议所有标准品、样本都做双份检测。
 
  4.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定须以酶标仪读数为准。
 
  5.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

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